Л.В. Ковальчук, О.В. Козырева, Е.В. Матушевская, Л.В. Ганковская

Кафедра кожных и венерических болезней лечебного факультета ГОУ ВПО РГМУ Росздрава

(зав. кафедрой — акад. РАМН проф. Ю.К. Скрипкин)

Кафедра иммунологии ГОУ ВПО РГМУ Росздрава

(зав. кафедрой акад. РАЕН проф. Л.В. Ковальчук)

Герпетическая инфекция (ГИ) является одним из наиболее распространенных латентно протекающих вирусных заболеваний человека, характеризующихся многообразием клинических проявлений. Одной из форм, вызываемых вирусом простого герпеса (ВПГ), является генитальный герпес (ГГ), занимающий, по данным ВОЗ, по распространенности третье место среди инфекций, передающихся половым путем. В настоящее время генитальный герпес представляет собой важную медицинскую и социальную проблему⁴. Определяющая роль в развитии и течении ГИ отводится специфическому клеточно-опосредованному иммунитету².

В основе патогенеза ГИ лежат нарушения иммунной системы, в частности, снижение активности различных клеточных элементов и изменения цитокинового статуса¹². У больных с тяжелым течением ГИ, как правило, наблюдается угнетение клеточного иммунитета, незавершенность фагоцитоза, преобладание зрелых форм вируса^3,8.

Цитокины интерлейкин-12 (ИЛ-12) и интерферон (ИФ) играют значительную роль в противовирусной защите организма больных рецидивирующим генитальным герпесом [9,11]. Известно, что уже в первые часы после инвазии вируса простого герпеса I и II типов клетки макрофагального ряда начинают вырабатывать ИФа и ФНОа, активирующие систему фагоцитарных клеток. Затем макрофаги продуцируют ИЛ-12, который, наряду с вышеупомянутыми цитокинами, стимулирует другие клетки, особенно NK-клетки, к выработке ИФу и к активации макрофагов. Также ИЛ-12 способствует дифференцировке наивных Т-хелперов в Т-хелперы 1 типа, продуцирующие ИФу, и регулирует деятельность цитотоксических Т-лимфоцитов⁶.

Целью исследования являлось определение содержания цитокинов ИЛ-12 и ИФу на системном и локальном уровнях, а также сравнительный анализ концентрации этих цитокинов до и после проведения цитокинотерапии препаратом суперлимф у больных рецидивирующим генитальным герпесом.

Материалы и методы исследования. Исследование проводилось у 36 больных (24 мужчины и 12 женщин) рецидивирующим генитальным герпесом (РГГ).

Определение цитокинов ИЛ-12 и ИФУ осуществлялось при помощи тест-систем фирмы «ВioSource International», основанных на методе твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA). Исследуемым материалом являлась сыворотка больных, а также соскоб эпителия из уретры. Исследования проводились в начале обострения и после проведенного лечения. В качестве контроля была набрана группа здоровых добровольцев. Забор крови у больных ГГ проводился из вены в количестве 10 мл, затем из нее получали сыворотку, которую в свою очередь распределяли в три пробирки Эппендорфа и замораживали. Соскобы из уретры и содержимое пузырьков получали с помощью стерильных одноразовых зондов (зонд универсальный ЗГ Бу-«ЦМ+» для взятия материала из цервикального канала и уретры), которые помещали в специальную полипропиленовую пробирку Эппендорфа объемом 1,5 мл в 100 мкл стерильного физиологического раствора и замораживали для дальнейшего хранения в течение месяца.

В сыворотке крови 36 больных РГГ В стадии обострения и 12 здоровых доноров определено содержание цитокинов ИЛ-12 и ИФу. Также было изучено содержание данных цитокинов в выделениях из уретры больных РГГ (14 человек) и здоровых мужчин (5 человек).

Иммунокорригирующую терапию проводили препаратом суперлимф, представляющим собой сбалансированный комплекс с активностью ряда цитокинов: интерлейкинов-1,3,6, фактора некроза опухоли (ФНО), миграцию ингибирующего фактора (МИФ), трансформирующих факторов роста ТФРВ и ТФРВ2 и противомикробных протегринподобных пептидов. Суперлимф назначали в качестве монотерапии по следующей схеме: суппозитории (25 ЕД) ректально на ночь ежедневно в течение 10 дней. Одновременно суперлимф применяли наружно в виде аппликаций на высыпания и эрозии 5 раз в день в течение 5-7 дней. Пациенты в группе сравнения получали лечение препаратом ацикловир (200 мг 5 раз в день в течение 5-10 дней). Кроме того, использовалась комплексная терапия, включающая препараты суперлимф (по представленной выше схеме) и ацикловир, который назначался по 200 мг 5 раз в день в течение 5-10 дней.

Результаты исследования. Концентрация ИЛ-12 в сыворотке крови здоровых доноров составила 534+82 пг/мл, а в сыворотке больных ГГ — 187±53пг/мл (р
<0,05). Ифу выявлялся в сыворотке в незначительной концентрации: 4±3 пг/мл у здоровых доноров и 947 пг/мл у больных ГГ, без статистически достоверных отличий. В то же время необходимо отметить, что ИЛ-12 выявлялся в сыворотке 100% обследованных доноров и больных, в то время как ИФу только у 20% обследованных здоровых доноров и у 80% больных ГГ.

Известно, что во многих случаях определение цитокинов в биологических жидкостях более информативно по сравнению с их определением в сыворотке. В частности, при развитии локального воспалительного процесса или при нарушении механизмов тканевой регенерации отсутствуют выраженные изменения в системном иммунном ответ^10,13.

В связи с этим нами изучено содержание данных цитокинов в выделениях из уретры больных РГГ. Содержание ИЛ-12 в выделениях из уретры больных герпесом возрастает по сравнению со здоровыми людьми примерно в 5 раз (32+8 г/мл и 6+4пг/мл соответственно). При исследовании содержания ИФу в выделениях из уретры больных РГГ обнаружено значительное увеличение содержания данного цитокина (более чем в 9 раз) по сравнению со здоровыми людьми (103±23 пг/мл и 11±2 пг/мл соответственно).

Обобщая полученные результаты можно отметить, что, по всей видимости, исследование цитокинов на локальном уровне является действительно более информативным при данной патологии. Однако определение цитокинов в сыворотке крови также может являться полезным для уточнения патогенеза заболевания.

В связи с тем, что нами был установлен факт изменения уровней исследуемых цитокинов ИЛ-12 и ИФу у больных РГГ, включение в терапию таких больных иммунотропного препарата суперлимф представляется патогенетически обоснованным. В литературе имеются данные, демонстрирующие влияние препарата на продукцию цитокинов различными клетками иммунной системы in vitro¹.

При проведении специфической противовирусной терапии и иммунокоррекции все пациенты, включенные в исследование. рандомизированы на три группы методом случайной выборки и равномерно распределены по возрасту, полу, продолжительности и тяжести заболевания.

Ознакомиться с материалом можно по ссылке: Ковальчук Л.В., Козырева О.В., Матушевская Е.В., Ганковская Л.В. Системное и локальное определение цитокинов и иммунокоррекция Суперлимфом у больных рецидивирующим генитальным герпесом. Вестник РГМУ, 4, 2007.