И. В. Виноградов^1,2, М. Ю. Габлия², Д. С. Рогозин³, О. Х. Тажетдинов⁴, Е. Г. Новикова^5,6, Д. М. Фатеев⁷, Ю. В. Олефир⁸, Г. М. В. Эстевеш¹

¹ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов», кафедра урологии и оперативной нефрологии с курсом онкоурологии, Москва, Россия; ²НКЦ репродуктивной и регенеративной медицины, Москва, Россия; ³ФГБОУ ВО ЮУГМУ МЗ РФ, кафедра общей и детской хирургии, Челябинск, Россия; ⁴ООО «Краснодарский медико-биологический центр», Краснодар, Россия; ⁵ООО «Клиника РДМЦ», Новосибирск, Россия; ⁶ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр фундаментальной и трансляционной медицины», Новосибирск, Россия; ⁷ООО «Медицинский центр диагностики и профилактики плюс», Ярославль, Россия; ⁸ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И. М. Сеченова» Минздрава России, Москва, Россия

Введение. Оксидативный стресс рассматривается как основная причина мужского бесплодия. Хирургическое лечение варикоцеле и устранение воспалительного процесса в добавочных половых железах могут способствовать снижению уровня оксидативного стресса, однако в большинстве случаев наряду с таким лечением проводится также антиоксидантная терапия. В настоящее время большое внимание как компоненту антиоксидантной терапии уделяется регуляторным пептидам ввиду наличия у них не только антиоксидантных, но также противовоспалительных и иммуномодулирующих свойств. В настоящем исследовании была проведена оценка эффективности применения комплекса противомикробных пептидов и цитокинов Суперлимф® в лечении мужского бесплодия, ассоциированного с высоким уровнем оксидативного стресса.

Цель исследования: оценка эффективности применения комплекса противомикробных пептидов и цитокинов Суперлимф® в лечении мужского бесплодия, ассоциированного с высоким уровнем оксидативного стресса.

Материалы и методы. В рамках открытого проспективного многоцентрового исследования были набраны 30 пациентов с повышенным уровнем активных форм кислорода. Пациентам выполнялись исследования: спермограмма (ВОЗ-2010), MAR-тест, измерение уровня фрагментации ДНК сперматозоидов и оксидативного стресса. Все пациенты получали Суперлимф® 25 ЕД/сут. в течение 60 дней, также по показаниям назначались антибиотики и витамин Д. Двенадцать пациентов в качестве дополнения к антиоксидантной терапии также принимали БАДы с антиоксидантным действием. По окончании курса лечения спермиологические исследования выполнялись повторно.

Результаты. Терапия с использованием препарата Суперлимф® приводила к улучшению стандартных показателей спермограммы, снижению уровня фрагментации ДНК сперматозоидов, а также к снижению уровня оксидативного стресса. По окончании курса лечения определялось статистически значимое увеличение показателя концентрации сперматозоидов (46,8 [30;87] против 62 [43–89], p=0, 002). После лечения также отмечалось увеличение медианы показателя нормальной морфологии (3 [1; 7] против 4,5 [2; 9], p=0,002). Медиана показателя фрагментации ДНК сперматозоидов была ниже по сравнению с данным до лечения, тем не менее эта разница не достигла статистической значимости (19 [14; 26] против 15 [10,5; 19,5], p=0,06). На фоне терапии отмечалось статистически значимое снижение уровня оксидативного стресса как у пациентов, принимавших Супелимф в качестве монотерапии (43 [27; 51] против 33 [22; 44], p=0,005), так и в составе комбинированной терапии с другими антиоксидантами (31 [22; 54] против 21 [12; 36], p=0,009).

Выводы. Применение препарата Суперлимф® способствует нормализации стандартных показателей спермограммы, снижению уровня фрагментации ДНК сперматозоидов и оксидативного стресса.

Введение. Спермограмма является основным методом диагностики мужского бесплодия, который позволяет оценивать мужской репродуктивный потенциал. В течение последних 40 лет эксперты ВОЗ пытаются стандартизировать методику исследования эякулята. За это время выпущено уже шесть обновлений этого руководства, в каждом из которых делалась попытка интерпретировать имевшиеся на момент публикации статистические данные для разделения популяции фертильных и бесплодных мужчин¹.

Авторы шестого издания отдельно подчеркнули значимость исследования уровня оксидативного стресса и посвятили отдельный подраздел этому исследованию. С учетом большого количества публикуемых исследований, говорящих о влиянии избыточной продукции активных форм кислорода на мужскую фертильность, а также выделения многими авторами мужского бесплодия, вызванного оксидативным стрессом как отдельной клинической группы², исследование уровня окислительного стресса может стать в отдельных клинических ситуациях рутинным.

Sulagna Dutta и соавт. в 2019 г. опубликовали научную работу, включившую 46 обзоров, 1 мета-анализ и 18 оригинальных исследований по проблеме оксидативного стресса. Авторы нашли связь окислительного стресса с патоспермией, выявили, что в физиологических условиях уровень активных форм кислорода определяет процессы созревания сперматозоидов, нормальной конденсации хроматина и оплодотворения³.

Zahra Beygi и соавт. в 2021 г., изучая роль окислительного стресса в развитии инфертильности, обнаружили, что почти у 50% всех бесплодных мужчин отмечались дисбаланс в уровне активных форм кислорода и повреждения ДНК сперматозоидов⁴.

Общеизвестно, что у инфертильных мужчин помимо правильного спермиологического диагноза необходимо определить верный клинический диагноз. И мероприятия по лечению бесплодия в идеале должны начинаться с устранения клинических предпосылок их инфертильности.

Однако, говоря о мужском бесплодии, ассоциированном с повышенным уровнем активных форм кислорода (АФК), этот подход не всегда приемлем. Не рекомендовано оперировать пациентов с варикоцеле старше 40 лет из-за невысокой эффективности оперативного лечения. Много дискуссий относительно лечения хронических воспалительных процессов органов репродуктивной системы мужчин из-за репротоксичности антибиотиков и длительности подобного лечения⁵.

Именно поэтому остается актуальной проблема поиска эффективных лекарственных препаратов с антиоксидантным действием.

Все антиоксиданты разделяют на антиоксиданты опосредованного и направленного действий. Первые способны снижать интенсивность свободно-радикального окисления только в биологических объектах, но неэффективны in vitro. Механизмы их действия различны: активация (реактивация) антиоксидантных ферментов; подавление в организме реакций, приводящих к образованию активных форм кислорода; сдвиг реакций свободно-радикального окисления в сторону образования менее реакционноспособных соединений; нормализация обмена веществ и т.д. Антиоксиданты направленного действия, наоборот, обладают непосредственными антирадикальными свойствами, которые можно обнаружить в тестах in vitro⁶.

В подавляющем большинстве случаев используемые в клинике антиоксиданты – это гидрофобные соединения, способные к взаимодействию с радикалами, локализованными в основном в гидрофобной зоне мембран и липопротеинов. Однако первая острая фаза воспалительных заболеваний проходит в условиях гиперпродукции активных форм кислорода, локализованных в водной фазе, где наибольшей эффективностью обладают гидрофильные вещества, оказывающие влияние на концентрацию ионов двухвалентного железа⁶.

Поэтому наибольшее распространение получили L-карнитины, токоферол, коэнзим Q10, производные 3-оксипиридина (мексидол), производные янтарной кислоты и некоторые другие⁷.

Среди новых классов препаратов с антиоксидантной активностью можно выделить регуляторные пептиды, так как появляется все больше публикаций об их благоприятном воздействии на оксидативный стресс⁸.

Нами было проведено исследование по изучению антиоксидантной активности препарата Суперлимф, который представляет собой комплекс противомикробных пептидов и цитокинов.

Препарат стимулирует функциональную активность клеток фагоцитарного ряда (моноцитов и нейтрофилов): активирует фагоцитоз, выработку цитокинов (ИЛ-1, ФНО), индуцирует противоопухолевую цитотоксичность макрофагов, способствует гибели внутриклеточных паразитов, регулирует миграцию клеток в очаг воспаления, увеличивает активность естественных киллеров. Препарат обладает антиоксидантной активностью, снижает развитие воспалительных реакций и предназначен для комплексного лечения воспалительных заболеваний урогенитального тракта, в том числе осложненных бактериальными и вирусными инфекциями⁹.

Цель исследования: оценка эффективности применения комплекса противомикробных пептидов и цитокинов Суперлимф® в лечении мужского бесплодия, ассоциированного с высоким уровнем оксидативного стресса.

Материалы и методы. Проведено открытое проспективное многоцентровое исследование с включением 30 пациентов с инфертильностью, ассоциированной с повышенным уровнем активных форм кислорода, которым исследователями в рамках рутинной практики был назначен препарат Суперлимф в комплексной терапии. Длительность курса Суперлимф® – 25 ЕД/сут. (1 суппозиторий) ректально на ночь, 60 дней. Комплексная терапия назначалась исходя из клинических рекомендаций, утвержденных МЗ РФ. В ходе исследования пациентам по показаниям назначались антибиотики (левофлоксацин в дозировке 1000 мг в 2 приема в сутки), витамин Д в дозировке 4000 МЕ. Двенадцати пациентам с идиопатическим бесплодием назначались карнитин-содержащие БАДы.

Включались пациенты в возрасте от 18 до 45 лет с нарушением репродуктивной функции в форме олиго-, и/или астено-, и/или тератозооспермии, и/или повышенной фрагментацией ДНК сперматозоидов на фоне повышения уровня активных форм кислорода.

Средний возраст участников составил 32,4±3,27 года. Диапазон колебался от минимального в 21 год до максимального – 44 года. Поэтому демографические характеристики пациентов на ход исследования влияния оказать не могли.

Клинические диагнозы у пациентов с повышенным уровнем АФК: хронический бактериальный простатит – 11 человек; варикоцеле (при отказе пациента от оперативного лечения) – 7; идиопатическое бесплодие – 12 человек.

В исследование не включались пациенты со следующими сопутствовавшими заболеваниями: врожденные аномалии развития половых органов; острые воспалительные заболевания органов мочевыделительной системы; нейрогенные дисфункции мочевого пузыря, склероз шейки мочевого пузыря, стриктура уретры, ДГПЖ. Также исключалось участие пациентов с аутоиммунными заболеваниями, в том числе наличие антиспермальных антител (MAR-IgG >50%); хроническим алкоголизмом/наркоманией; не способных адекватно отвечать на вопросы исследователя, заполнять необходимые документы и принимать исследуемый препарат.

После определения соответствия пациента критериям включения/исключения и подписания пациентом письменного согласия на участие в исследовании собирался анамнез, проводился физикальный осмотр. Пациентам выполнялась спермограмма (по ВОЗ-2010), определение MAR-теста Ig G; продукция активных форм кислорода (АФК/ROS) в нативной сперме; продукция активных форм кислорода (АФК/ROS) отмытыми сперматозоидами; микробиологическое исследование спермы на аэробные микроорганизмы с чувствительностью к антибиотикам; проводилось исследование ПЦР-13 мазка из уретры; определялась фрагментация ДНК сперматозоидов.

На контрольном визите оценивалась комплаентность, выполнялась спермограмма (по ВОЗ-2010), продукция активных форм кислорода (АФК/ROS) в нативной сперме; определялась фрагментация ДНК сперматозоидов.

Полученные клинические и лабораторные данные регистрировались в бумажных ИРК и сводились в единый электронный документ.

Оценка безопасности проводилась на основании зарегистрированных нежелательных явлений.

Ознакомиться с материалом можно по ссылке: Виноградов И.В., Габлия М.Ю., Рогозин Д.С., Тажетдинов О.Х., Новикова Е.Г., Фатеев Д.М., Олефир Ю.В., Эстевеш Г.М.В. Лечение инфертильности у мужчин с патоспермией на фоне оксидативного стресса. Урология 2023.