Д.м.н. Т.П. ИВАНЮШКО*, д.м.н., проф. Л.В. ГАНКОВСКАЯ, к.м.н. С.В. ШАМАНАЕВ, д.м.н. О.А. СВИТИЧ, к.м.н. Д.Д. КАРТАШОВ, к.м.н. В.В. ГРЕЧЕНКО, Р.А. БАЛЫКИН

Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова; Российский национальный медицинский университет им. Н.И. Пирогова Минздрава России, Москва

Молекулярное исследование врожденных факторов иммунитета было проведено на 45 пациентах с гнойновоспалительными заболеваниями челюстно-лицевой области (ГВЗ ЧЛО). Изучена группа катионных низкомолекулярных пептидов — α- и β-дефензинов, обладающих прямой антибактериальной активностью и участвующих в регуляции иммунных процессов. У больных ГВЗ ЧЛО экспрессия дефензинов в слизистой оболочке полости рта была в 20 раз выше по сравнению с контрольной группой (12 здоровых лиц). Изучение факторов врожденного иммунитета выявило их важную роль в развитии ГВЗ ЧЛО. Для повышения эффективности лечения больных с ГВЗ ЧЛО рекомендована цитокинотерапия.

Гнойно-воспалительные заболевания челюстно-лицевой области (ГВЗ ЧЛО), представляющие угрозу для здоровья и жизни больных, являются одной из актуальных проблем стоматологии.

В этиологии ГВЗ ЧЛО решающую роль играют 2 основных фактора: активность резидентной микрофлоры полости рта и состояние врожденного иммунитета слизистой^1,2,11-13,16.

В настоящее время активно изучаются механизмы врожденного иммунитета на уровне слизистых оболочек. Важнейшими эффекторными молекулами, обеспечивающими противомикробную защиту, являются низкомолекулярные пептиды — дефензины^{5,7,9,10,15,17}.

Дефензины обладают широким спектром антимикробной активности, вызывая гибель микроорганизмов вследствие нарушения целостности их мембран. Дефензины называют эндогенными антибиотиками. Помимо прямого микробицидного действия, отмечено их опосредованное влияние на гуморальный и клеточный иммунный ответ^7,8. Известно, что провоспалительные цитокины индуцируют выработку дефензинов¹⁴.

В работах ряда авторов показано, что эпителиальными клетками слизистой оболочки полости рта вырабатываются β-дефензины, осуществляющие защиту полости рта (СОПР) от бактериальной инвазии и препятствующие колонизации патогенными микроорганизмами слизистой оболочки. Некоторые β-дефензины секретируются эпителием конститутивно (HBD-1), другие являются индуцибельными (HBD-2, 3) и вырабатываются при стимуляции микробными компонентами рецепторов врожденного иммунитета.

При попадании микробов в кровяное русло происходит экспрессия нейтрофилами противомикробных пептидов α-дефензинов, которые локализованы в гранулах нейтрофилов. Механизм их действия аналогичен таковому у перфоринов, они участвуют в лизисе микробов и вирусов.

Определение уровня α- и β-дефензинов у больных с ГВЗ ЧЛО позволяет оценить уровень противомикробной защиты и имеет значение для прогноза течения заболевания, определения эффективности лечения, показаний к назначению иммунотерапии.

Цель нашей работы — изучение роли противомикробных пептидов — α- и β-дефензинов у больных с ГВЗ ЧЛО и обоснование иммунотерапии как патогенетического лечения.

Задачами исследования было:

определить уровень экспрессии гена β-дефензина (HBD-3) эпителиальными клетками полости рта у здоровых людей и больных ГВЗ ЧЛО;
оценить уровень α-дефензинов (HNP-3) в плазме крови у здоровых людей и больных ГВЗ ЧЛО;
сопоставить уровни противомикробных пептидов с клиническими проявлениями заболевания;
проанализировать изменение уровня дефензинов в процессе лечения больных ГВЗ ЧЛО;
оценить эффективность цитокинотерапии препаратом суперлимф в комплексном лечении больных ГВЗ ЧЛО.

Материал и методы

Больным одонтогенными флегмонами (ОФ) (n=45) применялось традиционное лечение: оперативное вмешательство, противовоспалительная и десенсибилизирующая терапия, общеукрепляющая и детоксикационная терапия.

Оперативное вмешательство включало в себя широкое вскрытие гнойного очага, создание хорошего оттока отделяемого, дренирование раны, удаление причинного зуба. Хирургическое лечение выполняли под общим или комбинированным обезболиванием, а также под местной анестезией. После вскрытия гнойную полость обрабатывали антисептическими растворами. Антибактериальная терапия предусматривала применение антибиотиков широкого спектра действия и препаратов метронидазола. Длительность антибактериальной терапии составляла 7—10 дней. Детоксикационная терапия проводилась в отделении реанимации и интенсивной терапии.

Общее состояние больных с ОФ оценивали по степени выраженности системной воспалительной реакции⁴.

В зависимости от выраженности синдрома системной воспалительной реакции выделяли легкую, среднюю и высокую степени тяжести заболевания.

Больных с ОФ условно подразделяли на группы сравнения (n=35) и основную (n=10). В группе сравнения применяли традиционную терапию; в основной, помимо традиционной терапии — цитокинотерапию препаратом суперлимф. Суперлимф представляет собой комплекс цитокинов и противомикробных пептидов, оказывающих противовоспалительное, иммуностимулирующее и ранозаживляющее действие⁶.

Суперлимф применяли в виде суппозиториев (25 ед. активности) ежедневно 1 раз в течение 10 дней.

Из лабораторных методов использовали определение: общий анализ крови, СОЭ, биохимических и других показателей, а также определение дефензинов.

Экспрессию гена β-дефензина в соскобах клеток эпителия СОПР оценивали у 25 больных ОФ и 12 здоровых доноров методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Реакцию проводили согласно рекомендациям фирмы-производителя (Институт Аналитического Приборостроения РАН, РФ) в амплификаторе АНК-32. Учет результатов вели с помощью программного обеспечения, прилагающегося к детектирующему амплификатору АНК-32³.

Уровень противомикробных пептидов HNP-3 (α-дефензинов нейтрофилов) определяли у 20 больных ОФ с помощью иммуноферментного анализа (ИФА), концентрацию HNP-3 в плазме периферической крови — с помощью коммерческих наборов для ИФА наборов (HBT, Нидерланды), предназначенных для ИФА, основанного на принципе сэндвича. Оптическую плотность измеряли на анализаторе иммуноферментных реакций («Пикон», РФ).

Ознакомиться с материалом можно по ссылке: Иванюшко Т.П., Ганковская Л.В. , Шаманаев С.В., Свитич О.А., Карташов Д.Д., Греченко В.В., Балыкин Р.А. Изучение содержания дефензинов у больных с гнойно-воспалительными заболеваниями челюстно-лицевой области. Стоматология № 2, 2014